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技術(shù)文章
溶酶體熒光探針(Probes for Lysosomes)

溶酶體熒光探針(Probes for Lysosomes)專題

 

 

搜索關(guān)鍵詞:

溶酶體(Lysosome);Acidic Organelle 酸性細(xì)胞器;MitoTracker;MitoSOX;LysoTracker;LysoSensor;溶酶體貯積癥(Lysosome Storage Diseases,LSDs)

 

基本介紹:

溶酶體(Lysosome)又稱為溶質(zhì)體,是由單層膜圍成的球狀體,主要化學(xué)成分為脂類和蛋白質(zhì)。溶酶體內(nèi)富含幾十種酸性水解酶,包括蛋白酶、核酸酶、磷酸酶、糖苷酶、脂肪酶、磷酸酯酶及硫酸酯酶等,能夠控制多種內(nèi)源性和外源性大分子物質(zhì)的消化。因此,溶酶體具有溶解或消化功能,是物質(zhì)代謝的場(chǎng)所。

 

溶酶體結(jié)構(gòu)和功能異常引起的疾病稱為溶酶體病。常見的有溶酶體相關(guān)的遺傳性疾病,致病機(jī)理在于酸性水解酶合成基因突變引起酶合成障礙,造成溶酶體酶缺乏,從而致使相應(yīng)酶代謝底物不能降解而積蓄在溶酶體中,造成細(xì)胞代謝障礙,形成溶酶體貯積癥。溶酶體異常還與休克、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、腫瘤等疾病發(fā)生有關(guān)聯(lián)。

 

溶酶體系列探針:

一、LysoTracker Probes(酸性細(xì)胞器選擇性的細(xì)胞膜滲透性探針)

1、傳統(tǒng)溶酶體探針的缺點(diǎn):

弱堿性胺類選擇性聚積在低pH的細(xì)胞區(qū)室(cellular compartments),可用來研究溶酶體的生物合成和發(fā)病機(jī)制。zui常用的一種酸性細(xì)胞器探針為DAMP,本身無熒光,需要與抗DNP抗體聯(lián)合使用,并直接或間接偶聯(lián)到熒光素或酶上,從而可視化觀察染色特征。熒光探針中性紅和吖啶橙也常用來染酸性細(xì)胞器,即使無染色特異性。

 

2、LysoTracker溶酶體探針的優(yōu)點(diǎn)

正是以上缺點(diǎn)促使我們開發(fā)替代性的酸性細(xì)胞器選擇性探針,用于短期和長(zhǎng)期示蹤研究。

Lysotracker探針是向酸性熒光探針,用于活細(xì)胞內(nèi)酸性細(xì)胞器的標(biāo)記和示蹤。這些探針具有幾個(gè)重要特征,包括高度選擇靶向酸性細(xì)胞器和納摩爾濃度有效標(biāo)記活細(xì)胞。另外,LysoTracker系列有幾種熒光顏色,特別適合用于多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。

Lysotracker探針,含一連接到弱堿基上的熒光素,中性pH下呈部分質(zhì)子化,能夠自由穿透細(xì)胞膜且典型聚集在球形細(xì)胞器上。研究發(fā)現(xiàn),Lysotracker探針必須在極低濃度(通常約50nM)下才能獲得優(yōu)異的選擇性。這些探針的滯留(retention)機(jī)制雖然沒有被*研究透,但很可能與酸性細(xì)胞器的質(zhì)子化和滯留性有關(guān),即使后續(xù)的弱堿性細(xì)胞滲透化合物處理細(xì)胞通常不會(huì)可逆化染色結(jié)果。Lysotracker探針的內(nèi)吞化動(dòng)力學(xué)研究顯示染料進(jìn)入活細(xì)胞的攝入速率僅幾秒即可。然而,這些溶酶體探針會(huì)導(dǎo)致溶酶體被堿化,比如長(zhǎng)期孵育會(huì)誘使溶酶體pH的增加。因此,建議成像前用探針孵育細(xì)胞的時(shí)間僅1-5min就好。

 

3、LysoTracker溶酶體探針產(chǎn)品

我們提供5種Lysotracker探針,它們?cè)诠庾V特性和使用特點(diǎn)上有所差異,具體見下表。

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

Ex/Em(nm)

規(guī)格

價(jià)格(元)

L7525

LysoTracker Blue DND-22 藍(lán)色

373/422

20 x 50 µL

4,298.00

L7526

LysoTracker Green DND-26 綠色

504/511

20 x 50 µL

4,319.00

L12491

LysoTracker® Yellow-HCK-123 黃色

465/535

20 x 50 µL

4,267.00

L7528

LysoTracker® Red DND-99 紅色

577/590

20 x 50 µL

4,268.00

L12492

LysoTracker® Deep Red 遠(yuǎn)紅

647/668

5 x 50 µL

3,215.00

以上所有產(chǎn)品均為Life(Invitrogen)原裝,原始包裝為20x50 µl(20支50µl單個(gè)包裝構(gòu)成)或5x50 µl(5支50µl單個(gè)包裝構(gòu)成)。我司對(duì)L7526,L7528進(jìn)行拆開銷售,特惠價(jià)為380元/支,單支50µl,現(xiàn)貨銷售,歡迎訂購(gòu)。

 

二、LysoSensor Probes(酸性細(xì)胞器選擇性的pH指示劑)

1、產(chǎn)品描述

為滿足研究者研究活細(xì)胞內(nèi)溶酶體生成和功能的動(dòng)力學(xué)特征,特此開發(fā)Lysosensor系列探針。

LysoSensor探針是一種區(qū)分酸性細(xì)胞器的熒光pH指示劑。該系列染料屬于向酸性探針,能夠聚集在呈質(zhì)子化的酸性細(xì)胞器上。這一質(zhì)子化過程使得因弱堿性側(cè)鏈而封閉熒光的探針得以熒光釋放,促使熒光信號(hào)增強(qiáng)。因此,LysoSensor探針遇酸后熒光信號(hào)呈現(xiàn)pH依賴性的增強(qiáng)。

 

2、 LysoSensor溶酶體探針產(chǎn)品

我們提供3種Lysosensor探針,它們?cè)诠庾V特性和使用特點(diǎn)上有所差異,具體見下表。

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

Ex/Em(nm)

pKa

規(guī)格

價(jià)格(元)

L7533

LysoSensor Blue DND-167 藍(lán)色

373/425

5.1

20 x 50 µL

4,174.00

L7535

LysoSensor Green DND-189 綠色

443/505

5.2

20 x 50 µL

4,225.00

L7545

LysoSensor Yellow/Blue DND-160 藍(lán)/黃色

384/540, 329/440

4.2

20 x 50 µL

4,211.00

以上所有產(chǎn)品均為Life(Invitrogen)原裝,原始包裝為20x50 µl(20支50µl單個(gè)包裝構(gòu)成)。我司對(duì)L7545進(jìn)行拆開銷售,特惠價(jià)為550元/支,單支50µl,現(xiàn)貨銷售,歡迎訂購(gòu)。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

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